Préparez-vous à franchir les limites de la détection des VE ! Allez plus loin !
Les vésicules extracellulaires sont des acteurs clés de la communication intercellulaire, jouant un rôle significatif dans le développement des réponses immunitaires, la régénération des tissus, la croissance tumorale, et plus encore. Cependant, leur analyse est compliquée par les limitations de la cytométrie traditionnelle dans la détection des vésicules extracellulaires de moins de 100 nm.
Avec le CytoFLEX nano, abaissez les limites de détection, afin que vous puissiez réaliser davantage.
Une nouvelle approche de la cytométrie en flux à l'échelle nanométrique avec le BECKMAN COULTER CytoFLEX nano
La cytométrie en flux à l'échelle nanométrique est une technique de pointe qui combine les principes de la cytométrie en flux avec la nanotechnologie. Elle permet l'analyse de particules à l'échelle nanométrique, fournissant des informations précieuses sur leur taille, leur composition et leurs propriétés de surface. La cytométrie en flux à l'échelle nanométrique a de nombreuses applications dans divers domaines, y compris la biologie, la médecine et la science des matériaux. Elle permet aux chercheurs d'analyser et de caractériser des nanoparticules, des vésicules extracellulaires (EV) et d'autres petites particules avec une grande précision et sensibilité. De plus, la cytométrie en flux à l'échelle nanométrique promet également de contribuer au développement d'outils de diagnostic et de systèmes de délivrance ciblée de médicaments. La capacité d'analyser les nanoparticules en fonction de leurs caractéristiques ouvre de nouvelles possibilités pour la médecine personnalisée et la nanomédecine.
Demandez à nos experts
Le CytoFLEX nano est le premier cytomètre en flux à l'échelle nanométrique conçu spécifiquement pour détecter des nanoparticules, telles que les vésicules extracellulaires (EV), d'une taille minimale de 40 nm, tout en effectuant simultanément une détection fluorescente multiparamétrique. L'interface logicielle du CytoFLEX nano, CytExpert nano, offre la sophistication nécessaire pour explorer l'inconnu à l'échelle nanométrique tout en fournissant les caractéristiques de facilité d'utilisation de la plateforme CytoFLEX. De cette manière, obtenir des réponses à des questions de recherche difficiles devient plus facile que jamais pour les chercheurs sur les EV.
Qu'est-ce qui rend le CytoFLEX nano unique ?
Construit sur les mêmes principes que la plateforme CytoFLEX, le CytoFLEX nano combine les capacités de diverses méthodes en une seule plateforme, garantissant la détection de nanoparticules aussi petites que 40 nm, l'analyse de marqueurs EV individuels même avec une faible expression (<10 copies d'antigène), et la capacité de fournir une analyse standardisée, rapide et précise sans utiliser plusieurs systèmes.
Source Beckman Coulter - Figure 1. La taille des différentes cellules et des vésicules extracellulaires. Le cytomètre de flux Nano CytoFLEX peut détecter, caractériser et déterminer la taille des vésicules extracellulaires aussi petites que 40 nm
Avantages et caractéristiques clés
Sensibilité et Détection Multi-Canaux
6 canaux fluorescents et 5 canaux de diffusion latérale permettent une analyse détaillée même des plus petites particules. L'augmentation de la puissance du laser et les chemins d'excitation optique spécialement conçus collectent plus de lumière, améliorant ainsi l'efficacité de l'analyse.
Données de pureté et minimisation de la contamination
Les outils de nettoyage automatisés détectent et éliminent rapidement la contamination, minimisant le risque de perte d'échantillons à <1%.
Le processus de contrôle qualité quotidien détecte le bruit des nano- et micro-bulles et déclenche un purgation et un nettoyage automatiques.
Systèmes optiques et fluidiques optimisés
Des débits réduits d'échantillons et de fluide de protection permettent de travailler avec des micro-échantillons, garantissant une grande précision des résultats.
La collecte d'échantillons avec une pompe à piston de petit volume garantit la stabilité et la précision du comptage (>90 %).
Un fluide de gainage spécialisé, combiné à un filtre variable de 5 nm, minimise le bruit de fond.
Facilité d'utilisation
Le logiciel intuitif CytExpert permet une configuration facile du système et une adaptation aux besoins des utilisateurs à tous les niveaux.
L'automatisation des processus réduit le temps et simplifie la préparation des échantillons.
Le CytoFLEX nano combine tout en un seul instrument, permettant le comptage, la caractérisation et la détermination de la taille
GESTION DES TESTS TOTALE
La détermination de la taille des particules par cytométrie en flux nécessite une calibration utilisant une particule de référence caractérisée de manière appropriée associée à une méthode de calibration. Les particules en polystyrène latex sont l'outil de choix pour cette tâche en raison de leur nature traçable par le NIST et de leur fabrication de manière fiable et cohérente. Grâce à la méthode de calibration enseignée à chaque client de cytomètre en flux nano CytoFLEX, les données seront rapportables de manière fiable en unités absolues pour la comparaison et la corrélation des méthodes.
COMPTE
Les méthodes de comptage les plus robustes reposent sur une livraison volumétrique des échantillons hautement contrôlée plutôt que sur un chargement manuel des échantillons avec la variabilité implicite. Le cytomètre de flux nano CytoFLEX permet aux utilisateurs de personnaliser la manipulation de leurs échantillons afin que la bonne quantité d'échantillon soit utilisée pour les résultats nécessaires.
CARACTÉRISER
La capacité de décrire des particules à l'échelle nanométrique nécessite une sensibilité de premier ordre. Pour rendre cela possible, le cytomètre de flux nano CytoFLEX a complètement repensé le système d'optique et de fluidique afin de maximiser la détection même des plus petites quantités de fluorescence sur 6 canaux de détection et excitée par 4 lasers collinéaires.
Explorez l'ensemble de votre expérience sur les EV avec le cytomètre de flux nano CytoFLEX.
Ce cytomètre en flux conçu sur mesure offre une plus grande sensibilité, des performances instrumentales constantes et une flexibilité pour étudier votre échantillon.
Sensibilité
Avec une sensibilité de taille sans pareille allant de 1µm à 40nm* et une résolution de 10nm,** le cytomètre de flux nano CytoFLEX permet la détection de populations d'EV plus petites et de leur cargaison en faible abondance.
Flexibilité
Ouvrez votre recherche avec 6 canaux fluorescents et 5 canaux de diffusion latérale. Rassemblez toutes les données nécessaires avec moins de contraintes.
Consistance Maximale
Maintenir une performance instrumentale robuste et sans contamination est essentiel lors du travail avec de petites particules. Obtenez des résultats reproductibles en qui vous pouvez avoir confiance avec une précision de comptage volumétrique de >90 % et <1 % de transfert entre les échantillons grâce à des contrôles qualité automatisés.
Familiarité
Construit sur les mêmes principes que la plateforme CytoFLEX, le cytomètre en flux nano CytoFLEX présente une empreinte similaire et une interface logicielle conviviale.
Intéressé à apprendre comment faire progresser vos recherches sur les vésicules extracellulaires ?
Découvrez comment le cytomètre de flux nano CytoFLEX de BECKMAN COULTER brise les limites précédentes des capacités de détection, armant les chercheurs de données auxquelles ils n'auraient jamais pu accéder auparavant.
Lors du choix d'un instrument de cytométrie en flux, il y a trois facteurs clés à considérer :
Le comptage, la détermination de la taille et la caractérisation des vésicules extracellulaires (EV) offrent aux chercheurs des aperçus plus profonds sur la santé des cellules et des organes ainsi que sur les profils de maladies. Cependant, les EV peuvent être difficiles à analyser en raison de leur petite taille et de leur hétérogénéité.
Le besoin de normalisation
Jusqu'à présent, les scientifiques ont dû utiliser plusieurs techniques pour compter, caractériser et déterminer avec précision la taille des EV, afin d'obtenir les informations dont ils ont besoin. En conséquence, des flux de travail qui sont chronophages et ont une faible répétabilité sont souvent nécessaires.
Webinaire : Premières expériences avec le CytoFLEX nano
Ce webinaire met en vedette Alfonso Blanco, Directeur du Flux à l'University College Dublin, qui présentera les résultats préliminaires obtenus par des chercheurs étudiant les vésicules extracellulaires (EVs) en utilisant le cytomètre de flux nano CytoFLEX.
Ce webinaire explore les limites de la technologie de cytométrie en flux et décrit comment le cytomètre de flux nano CytoFLEX est conçu pour aider à surmonter ces limitations dans un système robuste et cohérent capable de standardiser les résultats entre les laboratoires. Notre intervenant expert, Alfonso Blanco, discute des avantages de l'utilisation de la fluorescence combinée à plusieurs dispersions pour une caractérisation plus approfondie des nanoparticules et des vésicules extracellulaires.
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Revue de presse : Ce qu'ils disent des récentes avancées et des perspectives dans la recherche sur les vésicules extracellulaires
Dans l'article, "Les développements dans la recherche sur les vésicules extracellulaires (EV) présentent un avenir prometteur", publié dans Technology Network - juillet 2024, Matthew Goff, responsable produit chez Beckman Coulter, aborde les sujets suivants :
- Traditional challenges in EV research
- Emergence of new technologies
- The importance of workflow automation
- How nanoscale technology is accelerating EV research
“....Avec une plus grande clarté dans les résultats, les EVs offrent des procédures avancées de diagnostic, de pronostic, de théranostique et de thérapie, tout en réduisant simultanément la nature invasive de la collecte d'échantillons. Surveiller la progression de la maladie ou créer des modèles thérapeutiques sur mesure est incroyablement puissant, mais cela nécessite une spécificité dans les méthodes analytiques. Cela est enfin disponible pour une variété de chercheurs. “Mettre à jour ce flux de travail est vraiment un moment excitant dans la recherche....”
Beckman Coulter Life Sciences révolutionne l'analyse des nanoparticules avec le lancement du cytomètre de flux CytoFLEX Nano.
Article publié dans le Réseau Technologique : 28 mars 2024
“...Le cytomètre de flux nano CytoFLEX brise les limites précédentes des capacités de détection, armant les chercheurs de données auxquelles ils n'auraient jamais pu accéder auparavant.” Cela peut ouvrir de nouvelles portes pour les chercheurs et permettre des découvertes révolutionnaires dans notre lutte contre une myriade de maladies. Les vésicules extracellulaires peuvent être trouvées partout, et maintenant les chercheurs ont enfin un outil pour voir ce qui a toujours été juste devant eux. Nous avons écouté les besoins de nos clients pour créer un carrefour analytique en augmentant la sensibilité grâce à des fluidiques, des optiques et des électroniques améliorées......
Les vésicules extracellulaires (VE) sont de petites particules liées à une membrane, libérées par les cellules dans l'environnement extracellulaire. Elles jouent des rôles importants dans la communication intercellulaire et sont impliquées dans divers processus physiologiques et pathologiques. Les VE sont classées en différents sous-types en fonction de leur biogenèse et de leur taille, y compris les exosomes, les microvésicules et les corps apoptotiques. Les exosomes ou petites VE mesurent généralement entre 30 et 150 nm. Ils se forment par bourgeonnement interne de corps multivésiculaires (MVB) à l'intérieur de la cellule, qui fusionnent ensuite avec la membrane plasmique, libérant les exosomes dans l'espace extracellulaire. Les exosomes contiennent diverses molécules bioactives, telles que des protéines, des lipides, des acides nucléiques (ADN, ARN) et des microARN, qui peuvent être transférées aux cellules cibles, influençant leur fonction et leur comportement. Les microvésicules, également connues sous le nom de grandes VE ou microparticules ou ectosomes, sont plus grandes que les exosomes, mesurant entre 100 et 1000 nm. Contrairement aux exosomes, les microvésicules se forment par bourgeonnement externe et élimination directe de la membrane plasmique. Elles transportent également une charge diversifiée de protéines, de lipides et d'acides nucléiques, et peuvent transférer ces molécules aux cellules récipiendaires.
Les corps apoptotiques sont les plus grands EV, mesurant généralement entre 1 et 5 µm. Ils sont libérés par des cellules mourantes lors du processus de mort cellulaire programmée (apoptose). Les corps apoptotiques contiennent des fragments cellulaires, des organites et du matériel nucléaire, et sont reconnus et engouffrés par des cellules phagocytaires pour faciliter leur élimination.
Des technologies telles que la cytométrie en flux nano, la microscopie électronique et des techniques de profilage moléculaire comme le séquençage d'ARN et la protéomique sont utilisées pour étudier et caractériser les EVs. Comprendre la biologie des EVs, leur contenu et leurs fonctions offre de grandes promesses pour faire avancer nos connaissances sur la communication cellulaire et leurs applications potentielles en diagnostics, thérapies et médecine régénérative. Actuellement, l'analyse des EVs est cruciale et difficile. Les méthodes d'isolement et de purification peuvent souffrir de faibles rendements, de contamination par d'autres particules et de difficultés de standardisation. L'hétérogénéité des populations d'EVs en termes de taille, de contenu et de biogenèse complique leur étude. Les EVs peuvent présenter des activités et des fonctions biologiques diverses selon leur origine cellulaire et leur contenu. Cependant, déchiffrer les fonctions spécifiques et les mécanismes d'action des EVs dans différents contextes reste un défi. L'hétérogénéité fonctionnelle des EVs nécessite une caractérisation plus complète et des tests fonctionnels standardisés. Les chercheurs dans le domaine des EVs travaillent activement à surmonter ces limitations en développant des techniques d'isolement améliorées, en standardisant les protocoles et en faisant progresser notre compréhension de la biologie des EVs. À mesure que le domaine progresse, surmonter ces défis aidera à libérer tout le potentiel de la recherche sur les EVs et ses applications dans divers domaines biomédicaux. L'une des plus grandes limitations est le besoin de plusieurs techniques pour compter, caractériser et déterminer avec précision la taille des EVs, ce qui entraîne des flux de travail longs et laborieux avec une faible répétabilité.