Acoerela : sondes optiques et standards de référence innovants pour les EV, nanoparticules, bactéries et recherches sur les tumeurs
Les sondes classiques pour vésicules extracellulaires (EV) génèrent souvent des signaux non spécifiques, ce qui complique l’interprétation des données.
Les sondes Acoerela résolvent ce problème en séparant clairement les signaux biologiques authentiques du bruit de fond. Leurs Liposomes de Référence facilitent également l’optimisation des instruments et la standardisation des essais, garantissant des résultats fiables et reproductibles.
Ces colorants membranaires hydrosolubles assurent un marquage très spécifique et stable des membranes cellulaires avec un bruit de fond minimal. Ils conviennent à de nombreuses applications en imagerie et en cytométrie en flux.
Découvrez en une minute l’ensemble des colorants avancés proposés par Acoerela dans cette vidéo.
Les premiers colorants lipophiles traversant entièrement la bicouche
Colorants hydrosolubles Acoerela
De nombreux colorants classiques sont fortement hydrophobes et doivent être reconstitués dans des solvants organiques comme le DMSO ou l’éthanol. Toutefois, ces solvants peuvent induire des artefacts dans les échantillons biologiques, car ils sont moins biocompatibles que les tampons aqueux.
De plus, certains colorants — tels que les carbocyanines — ont tendance à former des nanoagrégats lorsqu’ils sont dilués en série à partir de solutions mères préparées dans du DMSO ou de l’éthanol. Ces nanoagrégats peuvent produire des faux positifs, en particulier lors de l’analyse de petites particules biologiques comme les exosomes.
Pourquoi choisir Acoerela
Fluorogénicité
Les colorants Acoerela présentent un rendement quantique élevé (>25 %). L’augmentation marquée de fluorescence n’apparaît que lorsque les colorants sont liés à leur cible, en raison des variations de l’environnement hydrophobe. La différence nette entre les profils d’émission liés et non liés constitue le mécanisme « light-on ».
Large choix de couleurs
La plateforme chromophorique Acoerela permet actuellement de générer jusqu’à trois couleurs distinctes. Des développements sont en cours pour étendre les profils d’excitation et d’émission, offrant davantage de possibilités de multiplexage selon les applications.
Solubilité aqueuse
Les colorants Acoerela sont hautement solubles dans l’eau et ne forment ni micelles ni nanoparticules lorsqu’ils sont reconstitués dans un tampon aqueux. À l’inverse, les colorants PKH26, DiR et DiD peuvent conduire à des faux positifs en cytométrie en flux des exosomes en raison de la formation de nanoparticules.
>95 % de précision
Les colorants conventionnels présentent des taux de faux positifs supérieurs à 70 %, tandis que les colorants Acoerela atteignent une précision >95 %.
Rapide: 1 heure
Les colorants existants peuvent nécessiter plus de huit heures pour fournir des résultats. Les colorants Acoerela délivrent des données fiables en environ une heure.
Facile à utiliser : 1 étape
Les colorants traditionnels exigent des protocoles en plusieurs étapes. Les colorants Acoerela simplifient les workflows grâce à un protocole en une seule étape.
Colorants pour vésicules extracellulaires : colorants hydrosolubles pour le marquage de vésicules et exosomes nanométriques
Les colorants hydrosolubles Acoerela pour vésicules extracellulaires permettent une détection précise des vésicules extracellulaires, exosomes et liposomes de taille nanométrique, sans artefacts ni faux positifs provenant du colorant lui-même. Cette fiabilité repose sur une chimie brevetée qui empêche l’auto-assemblage des colorants en micelles ou en nanoparticules.
Les colorants Acoerela sont solubles dans les tampons aqueux (eau, PBS, solution saline) à des concentrations supérieures à 2 mg/mL. Ils présentent une forte émission et ne fluorescentr que lorsqu’ils sont liés à leur cible. Leur validation a été effectuée sur des exosomes issus de lignées cellulaires MSC, PC3, HT29 et A549.
Coloration Gram des bactéries
Acoerela propose des colorants permettant de visualiser les types Gram dans des mélanges bactériens, sans effet antimicrobien. Les bactéries sont généralement classées en Gram-positives ou Gram-négatives selon la structure de leur membrane. Les bactéries Gram-négatives possèdent une membrane externe riche en lipopolysaccharides (LPS), absente chez les Gram-positives.
Le colorant Gram-sélectif Acoerela exploite ces différences structurales et permet de marquer spécifiquement les bactéries Gram-positives grâce à une pénétration cellulaire plus rapide. La sélectivité du colorant a été démontrée dans des populations mixtes comprenant des espèces Gram-positives (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis) et Gram-négatives (Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli).
Colorants membranaires pour cellules de mammifères : colorants non cytotoxiques pour le suivi de la division cellulaire sur plusieurs générations
Le suivi de la division cellulaire est essentiel en recherche en biologie cellulaire, notamment pour l’étude de la régulation immunitaire, des fonctions cellulaires, de la quiescence, de la prolifération et de la différenciation. Les traceurs fluorescents de division cellulaire sont couramment utilisés en cytométrie en flux et en imagerie pour analyser les interactions et devenir des cellules, in vitro comme in vivo.
Les colorants membranaires Acoerela permettent de suivre efficacement la division des cellules de mammifères grâce à leur liaison membranaire stable et à leur faible cytotoxicité. Leur rendement quantique élevé assure un suivi fluorescent prolongé sur plusieurs générations cellulaires.
Colorant NR-II pour le suivi tumoral : sonde proche infrarouge II pour la surveillance in vivo de la croissance tumorale
Les colorants du proche infrarouge II (NIR-II) suscitent un intérêt croissant en raison de leur capacité à pénétrer profondément dans les tissus, de leur faible autofluorescence et du bruit de fond minimal associé à cette région du spectre électromagnétique.
Le colorant NIR-II d’Acoerela permet de suivre la croissance tumorale sur de longues périodes dans des modèles murins, sans perte notable d’intensité de fluorescence. Sa fluorescence durable et son rendement quantique élevé offrent aux chercheurs la possibilité de surveiller la progression tumorale et d’évaluer l’effet de traitements anticancéreux in vivo. Cette approche peut réduire le nombre de souris traditionnellement sacrifiées à intervalles réguliers pour caractériser la tumeur.
Colorants pour vésicules extracellulaires
Caractéristiques clés
- Hydrosolubles (>2 mg/mL)
- Marquage stable (>24 h)
- Aucun transfert de colorant entre vésicules
- Temps d’incubation court (~30–60 min)
- Large choix de couleurs disponibles
Analyse en cytométrie en flux d’exosomes marqués avec le colorant Acoerela pour vésicules extracellulaires
Représentation en dot plot de :
(a) exosomes non marqués
(b) exosomes marqués avec 1 µM de colorant Acoerela Exosome
(c) 1 µM de colorant Acoerela Exosome seul, et
(e) 1 µM de colorant commercial PKH26 seul, c’est-à-dire en l’absence d’exosomes.
Cytométrie en flux avec imagerie
Les exosomes PC3 ont été marqués avec le colorant Acoerela pour vésicules extracellulaires, puis purifiés à l’aide d’un filtre Amicon 100 kDa avant d’être ajoutés à des cellules A549, incubés et analysés sur le système ImageStream (Amnis) après (a) 2 h, (b) 4 h et (c) 8 h d’incubation.
Les exosomes marqués avec le colorant Acoerela apparaissaient sous forme de points fluorescents verts.
En l’absence d’exosomes, aucune fluorescence cellulaire n’a été observée, car l’ensemble du colorant libre avait été éliminé lors de la purification (d).
À l’inverse, les micelles du colorant DiD n’ont pas été éliminées, ce qui a entraîné la présence de fluorescence dans les cellules. Ce signal correspond à l’absorption d’agrégats de colorant, pouvant être confondus avec des exosomes marqués au DiD.
Colorants Gram-sélectifs pour bactéries
>GO TOP
Caractéristiques clés
- Forte émission
- Aucun effet antimicrobien sur les cellules bactériennes
- Utilisables en culture planctonique et en biofilms
- Élimination facile de l’excès de colorant
Le colorant Gram-sélectif Acoerela exploite les différences structurelles entre les parois cellulaires Gram-positives et Gram-négatives. Grâce à une entrée plus rapide dans les bactéries Gram-positives, il permet un marquage sélectif de ces espèces. La sélectivité a été démontrée dans des cultures mixtes comprenant des bactéries Gram-positives (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis) et Gram-négatives (Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli).
Une coloration Gram in situ d’un biofilm microbien mixte a été réalisée à l’aide du colorant Acoerela et d’un contre-colorant. Des images en microscopie confocale montrent E. faecalis (Gram positif, de forme coccique) et E. coli (Gram négatif, de forme bacillaire) dans un biofilm polymicrobien après un marquage séquentiel avec un colorant sélectif Gram-positif et un contre-colorant Gram-négatif.
(A) Images fusionnées des deux canaux :
(b) canal du colorant Gram-sélectif Acoerela (Ex405/Em450–490) et
(c) canal FM 4-64 (Ex639/Em640–700).
Colorants membranaires pour cellules de mammifères > GO TOP
Le suivi de la division cellulaire est essentiel en biologie cellulaire, notamment pour l’étude de la régulation immunitaire, des fonctions cellulaires, de la quiescence, de la prolifération et de la différenciation. Les traceurs fluorescents de division cellulaire sont couramment utilisés en cytométrie en flux et en imagerie pour analyser les interactions et devenir des cellules, in vitro comme in vivo. Les colorants membranaires.
Acoerela permettent un suivi précis de la division des cellules de mammifères grâce à leur liaison membranaire stable et leur faible cytotoxicité. Leur rendement quantique très élevé garantit un suivi fluorescent durable sur plusieurs générations.
Caractéristiques clés
- Rendement quantique élevé (>25 %)
- Liaison stable à la membrane des mammifères
- Faible photoblanchiment
- Faible cytotoxicité
- Adaptés au suivi de la division cellulaire et au marquage des globules rouges
- Large choix de couleurs disponibles
Colorant membranaire Acoerela
Images confocales de cellules HepG2 co-marquées avec le colorant membranaire Acoerela et un colorant membranaire commercial (FM 4-64).
(a) canal du colorant Acoerela (Ex405),
(b) canal FM 4-64 (Ex488),
(c) canal en champ clair,
(d) canal fusionné.
La co-localisation du colorant Acoerela avec FM 4-64 confirme la spécificité membranaire du colorant Acoerela.
Suivi de la division cellulaire Acoerela
Des cellules tumorales A549 ont été marquées avec le colorant Acoerela de suivi de division cellulaire. Les cellules marquées (rouge) présentaient une augmentation de fluorescence de 3 log par rapport aux cellules non marquées (noir). Cette intensité a été maintenue au cours de quatre passages successifs avant l’analyse sur le CytoFLEX (Beckman Coulter).
Orange : 1er passage, Vert : 2e passage, Bleu : 3e passage, Magenta : 4e passage.
Marquage des globules rouges
Une analyse en cytométrie en flux a été réalisée sur des échantillons contenant des mélanges de globules rouges (RBC) non marqués et marqués avec le colorant Acoerela, dans les proportions suivantes : (a) 0:5, (b) 2:3, (c) 3:2 et (d) 5:0. Le colorant Acoerela pour RBC reste stable dans les cellules après le marquage et ne se transfère pas vers les cellules non marquées, garantissant une séparation nette et sans contamination des populations cellulaires.
Colorant NIR-II Acoerela
Les colorants du proche infrarouge II (NIR-II) suscitent un intérêt croissant en raison de leur capacité à pénétrer profondément dans les tissus ainsi que de leur faible autofluorescence et du bruit de fond minimal dans cette région du spectre électromagnétique.
Le colorant NIR-II d’Acoerela permet de suivre la croissance tumorale sur de longues périodes dans des modèles murins, sans perte significative d’émission. Sa fluorescence durable et son rendement quantique élevé offrent la possibilité d’observer la progression tumorale et d’évaluer l’effet des traitements anticancéreux in vivo. Cette approche peut réduire le nombre de souris traditionnellement sacrifiées à intervalles réguliers pour la caractérisation de la tumeur.
Colorant membranaire Acoerela
- Fluorescence NIR-II intense (Ex859/Em1017)
- Compatible avec l’imagerie in vivo
- Signal durable (>14 jours)
- Faible cytotoxicité
- Haute solubilité dans l’eau
Imagerie in vivo
(En haut) Images fluorescentes in vivo d’une tumeur intracrânienne sur 14 jours et (en bas) d’une tumeur sous-cutanée sur 26 jours, obtenues à partir de l’émission du colorant NIR-II Acoerela. Dans les deux modèles, l’intensité de fluorescence augmente avec la croissance tumorale, permettant un suivi non invasif de la progression de la tumeur sans avoir à sacrifier les souris à intervalles réguliers.
Liposomes de référence AcoRL
Les liposomes de référence AcoRL sont des liposomes fluorescents pré-marqués, formulés avec un mélange de lipides synthétiques biologiquement pertinents et contenant 1 mol % d’Aco-Dyes (par rapport au contenu lipidique total). Ils constituent des standards fiables pour l’optimisation des instruments et les analyses basées sur la fluorescence.
Disponibles en formats contrôle positif et contrôle négatif, les liposomes AcoRL présentent une taille moyenne de particules comprise entre 50 et 100 nm. Ils permettent une visualisation et une analyse précises des échantillons marqués avec Aco-Dyes en cytométrie en flux ou sur d’autres plateformes de fluorescence.
DEMANDEZ UNE OFFRE : ANALIS - NAMUR 081 25 50 50 - GENT 092437710 - WWW.ANALIS.COM/ACOERELA - MAIL@ANALIS.BE
