Nieuw! Innovatieve oplossingen van Acoerela.
Optische probes en referentiestandaarden voor EVs, nanodeeltjes, bacteriën en tumoronderzoek.
Traditionele EV-probes genereren vaak niet-specifieke signalen, wat de interpretatie van gegevens bemoeilijkt.
De probes van Acoerela lossen dit op door echte biologische signalen duidelijk te scheiden van achtergrondruis. Hun referentieliposomen ondersteunen bovendien de optimalisatie van instrumenten en de standaardisatie van testen, waardoor reproduceerbare, betrouwbare resultaten worden gegarandeerd.
Deze unieke in water oplosbare membraankleurstoffen zorgen voor een zeer specifieke en stabiele kleuring van celmembranen met een zeer lage achtergrond en bieden een breed scala toepassingen in beeldvorming en flowcytometrie.
In deze video van één minuut komt u meer te weten over wat Acoerela te bieden heeft met ons assortiment kleurstoffen.
.
's Werelds eerste volledig dubbellaagse lipofiele wateroplosbare Acoerela-kleurstoffen
Veel kleurstoffen zijn zeer hydrofoob en moeten vaak worden gereconstitueerd in een organisch oplosmiddel zoals DMSO of ethanol. Helaas kunnen deze oplosmiddelen artefactveranderingen veroorzaken wanneer ze in biologische monsters aanwezig zijn, omdat ze niet zo biocompatibel zijn als waterige buffers. Bovendien hebben sommige kleurstoffen (bijvoorbeeld carbocyanine) de neiging om nanoaggregaten te vormen wanneer ze serieel worden verdund vanuit hun DMSO- of ethanolvoorraad. Deze nanoaggregaten van kleurstoffen zijn potentieel bronnen van vals-positieve signalen bij het analyseren van kleine biologische deeltjes zoals exosomen.
Waarom opteren voor Acoerela?
Fluorogeen
Acoerela-kleurstoffen worden gekenmerkt door een hoge kwantumopbrengst (>25%). De significante toename in fluorescentie wordt alleen waargenomen wanneer de kleurstoffen zich aan hun doelwit binden, waarbij er een verandering optreedt in de hydrofobiciteit van de omgeving rondom de kleurstoffen. Het grote verschil in emissieprofielen tussen gebonden en ongebonden kleurstoffen ligt ten grondslag aan het ‘licht aan’-mechanisme.
Diverse kleuropties
Het huidige chromofoorplatform van Acoerela-kleurstoffen stelt ons in staat om tot 3 verschillende kleuren te verkrijgen
en we breiden de excitatie-/emissieprofielen van deze kleurstoffen uit voor meer multiplexmogelijkheden in verschillende toepassingen.
Wateroplosbaar
Acoerela-kleurstoffen zijn zeer goed oplosbaar in water en vormen geen micellen of nanodeeltjes wanneer ze worden gereconstitueerd in een waterige buffer. Dit in tegenstelling tot de familie van PKH26-, DiR- en DiD-kleurstoffen die vals-positieve resultaten opleveren bij flowcytometrieanalyse van exosomen.
Precisie > 95 %
De huidige kleurstoffen hebben een percentage vals-positieve resultaten van meer dan 70%.
Snel: 1 uur
Doorgaans kan het meer dan 8 uur duren voordat de resultaten bekend zijn.
Eenvoudig gebruik: 1 stap
De huidge kleurstoffen vereisen meerdere stappen.
Extracellulaire vesikelkleurstoffen: in water oplosbare kleurstoffen voor het markeren van nanometergrote vesikels en exosomen.
De zeer goed in water oplosbare Acoerela extracellulaire vesikelkleurstoffen maken nauwkeurige detectie mogelijk van extracellulaire vesikels, exosomen en liposomen op nanoschaal, zonder artefacten of valspositieve signalen van de kleurstof zelf. Dit komt door de unieke gepatenteerde chemische samenstelling van de Acoerela-kleurstoffen, die voorkomen dat de kleurstof zichzelf assembleert tot micellen of nanodeeltjes.
De Acoerela-kleurstoffen zijn oplosbaar in waterige buffer (bijv. water, PBS, zoutoplossing) bij een concentratie van >2 mg/ml. Deze kleurstoffen zijn zeer emissief en fluoresceren alleen wanneer ze zich aan het doelwit binden. Ze zijn gevalideerd met exosomen verkregen uit MSC-, PC3-, HT29- en A549-cellijnen.
Gram-typering van bacteriën
Kleurstoffen waarmee Gram-types in bacteriële mengsels kunnen worden gevisualiseerd zonder antimicrobiële effecten.
Bacteriën worden meestal geïdentificeerd als grampositief of gramnegatief, afhankelijk van hun membraanstructuur. Gramnegatieve bacteriën worden doorgaans gekenmerkt door de aanwezigheid van een buitenmembraan dat bestaat uit sterk geladen lipopolysacchariden (LPS), die afwezig zijn in de gram-positieve tegenhangers.
De Acoerela Bacteria Gram-Selective Dye benut dit verschil in de celwand van de twee gram-types en kan worden gebruikt om selectief de grampositieve bacteriën te markeren, omdat de kleurstof sneller in de cel binnendringt. De selectiviteit van de Acoerela-kleurstof is getest in gemengde populaties van grampositieve bacteriën (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis) en gramnegatieve bacteriën (Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli).
Kleurstoffen voor zoogdiercelmembranen: niet-cytotoxische kleurstoffen voor het volgen van de celdeling bij zoogdieren over meerdere generaties.
Monitoring van de celdeling is een belangrijk onderdeel van celbiologisch onderzoek naar immuunregulatie, celfunctie, rusttoestand, proliferatie en differentiatie. Fluorescerende celdelingstrackers worden vaak gebruikt in flowcytometrie en beeldvorming om de interacties en het lot van verschillende celtypen in vitro en in vivo te bestuderen.
De Acoerela-membraankleurstoffen zijn geschikt voor het volgen van celdeling vanwege hun stabiele binding en lage cytotoxiciteit voor zoogdiercellen. Deze kleurstoffen hebben ook een zeer hoge kwantumefficiëntie, waardoor fluorescentie gedurende lange perioden kan worden gevolgd.
NR-II tumortraceerkleurstof: optische probe in het nabije infrarood II om tumorgroei in vivo te monitoren, niet-cytotoxisch in muismodellen.
Near-infrared II (NIR-II) kleurstoffen zijn de laatste jaren steeds populairder geworden vanwege het vermogen van het licht om dieper in weefsels door te dringen voor beeldvorming en de lage autofluorescentie en achtergrondsignalen in dat gebied van het elektromagnetische spectrum.
Met de Acoerela NIR-II-kleurstof kan de tumorgroei in een muismodel gedurende een langere periode worden gevolgd, zonder dat er sprake is van significante emissieverlies. Dankzij de langdurige fluorescentie en de relatief hoge kwantumopbrengst kunnen onderzoekers de progressie van tumoren en ook het effect van medicamenteuze behandelingen tegen kanker in vivo bestuderen. Hierdoor kan mogelijk het aantal proefmuizen worden verminderd dat traditioneel met regelmatige tussenpozen wordt geofferd om de tumor te karakteriseren.
Extracellulaire vesikelkleurstoffen
Belangrijkste kenmerken
- Wateroplosbaar (>2 mg/ml oplosbaarheid)
- Stabiele labeling (>24 uur)
- Geen uitwisseling van kleurstoffen tussen vesikels
- Korte incubatietijd (~30-60 minuten)
- Verkrijgbaar in verschillende kleuren
Flowcytometrieanalyse van exosomen gemerkt met Acoerela Extracellular Vesicles Dye.
Puntdiagram van (a) ongekleurde exosomen, (b) exosomen gemerkt met 1 µM Acoerela Exosome Dye, (c) alleen 1 µM Acoerela Exosome Dye en (e) alleen 1 µM commercieel verkrijgbare PKH26-kleurstof, d.w.z. zonder exosomen.
Beeldvormende flowcytometry
PC3-exosomen werden gelabeld met Acoerela Extracellular Vesicles Dye en gezuiverd met het Amicon 100KDa-filter voordat ze werden toegevoegd aan A549-cellen, geïncubeerd en geanalyseerd op Imagestream (Amnis) na (a) 2 uur, (b) 4 uur en (c) 8 uur incubatie.
Met Acoerela Extracellular Vesicles Dye gemerkte exosomen werden waargenomen als vlekjes (groen).
Bij afwezigheid van exosomen werd geen fluorescentie waargenomen in de cellen omdat alle vrije kleurstof was verwijderd (d).
Daarentegen werden micellen van DiD-kleurstof niet gezuiverd en werd er dus nog steeds fluorescentie waargenomen in de cellen. Dit wijst op de opname van de kleurstofaggregaten die kunnen worden beschouwd als DiD-gelabelde exosomen.
Gram-selective kleurstoffen voor bacteriën
>GO TOP
Belangrijkste kenmerken
- Hoge emissiviteit
- Niet-antimicrobieel t.o.v. bacteriële cellen
- Gebruik in zowel planktonische culturen als in biofilms
- Overtollige kleurstoffen zijn gemakkelijk af te spoelen
De Acoerela Bacteria Gram-Selective Dye benut dit verschil in de celwand van de twee gram-types en kan worden gebruikt om selectief de grampositieve bacteriën te markeren, omdat de kleurstof sneller in de cel binnendringt. De selectiviteit van de Acoerela-kleurstof is getest in gemengde populaties van grampositieve bacteriën (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis) en gramnegatieve bacteriën (Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli).
In situ gram-typering van een gemengde microbiële biofilm m.b.v. Acoerela-kleurstof en een tegenkleuring. Confocale microscopiebeelden van E. faecalis (grampositief, coccusvormig) en E. coli (gramnegatief, staafvormig) polymicrobiële biofilm na achtereenvolgende kleuring met een grampositieve selectieve kleurstof en een tegenkleuring voor gramnegatieve bacteriën. (A) Samengevoegde beelden van beide kanalen van (b) Acoerela gramselectieve kleurstofkanaal (Ex405/Em450-490) en (c) FM 4-64-kanaal (Ex639/Em640-700).
Membraankleurstoffen voor Zoogdiercellen
De Monitoring van celdeling is een belangrijk onderdeel van celbiologisch onderzoek naar immuunregulatie, celfunctie, rusttoestand, proliferatie en differentiatie. Fluorescerende celdelingstrackers worden vaak gebruikt in flowcytometrie en beeldvorming om de interacties en het lot van verschillende celtypes in vitro en in vivo te bestuderen. De Acoerela-membraankleurstoffen zijn geschikt voor het volgen van de celdeling vanwege hun stabiele binding en lage cytotoxiciteit bij zoogdiercellen. Deze kleurstoffen hebben ook een zeer hoge kwantumefficiëntie waardoor de fluorescentie gedurende lange perioden kan worden gevolgd.
- Hoge kwantumopbrengst (>25%)
- Stabiele binding aan zoogdiermembraan
- Geringe fotobleking
- Geringe cytotoxiciteit
- Geschikt voor het volgen van celdeling en het labelen van rode bloedcellen
- Verkrijgbaar in verschillende kleuren
Acoerela-celmembraankleurstof
Confocale beelden van HepG2-cellen die gelijktijdig zijn gekleurd met Acoerela Membrane Labelling Dye en een in de handel verkrijgbare membraankleurstof, FM 4-64. (a) Acoerela-kleurstofkanaal (Ex405), (b) FM 4-64-kanaal (Ex488), (c) helderveldkanaal, (d) samengevoegd kanaal.
De co-lokalisatie van Acoerela Membrane Dye en FM4-64 toont de membraanspecificiteit van de Acoerela-kleurstof aan.
Het traceren van de celdeling met Acoerela
A549 zoogdiertumorcellen gemerkt met Acoerela Cell Division Tracking-kleurstof. Acoerela-gekleurde cellen (rood) hebben een 3-log-voudige toename in fluorescentie-intensiteit in vergelijking met de ongekleurde cellen (zwart) en werden gedurende 4 passages van seriële overgang behouden voordat ze werden geanalyseerd op CytoFLEX (Beckman Coulter). Oranje: 1e passage, Groen: 2e passage, Blauw: 3e passage. Magenta: 4e passage.
Markering van rode bloedcellen
Markering van rode bloedcellen Flowcytometrieanalyse van monsters die een mengsel bevatten van ongekleurde rode bloedcellen (RBC) en RBC gekleurd met Acoerela-kleurstof, in de verhouding (a) 0:5, (b) 2:3, (c) 3:2 en (d) 5:0. De Acoerela-kleurstof voor RBC blijft na markering stabiel in de cel en komt niet terecht in monsters die niet met de kleurstof gemarkeerd moeten worden.
NIR-II Acoerela Kleurstof > NAAR BOVEN
Near-infrared II (NIR-II)-kleurstoffen zijn de laatste jaren steeds populairder geworden vanwege het vermogen van het licht om dieper in weefsels door te dringen voor beeldvorming en de lage autofluorescentie en achtergrondsignalen in dat gebied van het elektromagnetische spectrum. Met de Acoerela NIR-II-kleurstof kan de tumorgroei in een muismodel een langere periode worden gevolgd, zonder dat er sprake is van een significante emissiedaling. Dankzij de langdurige fluorescentie en de relatief hoge kwantumopbrengst kunnen onderzoekers de progressie van tumoren en het effect van medicamenteuze behandelingen tegen kanker in vivo bestuderen. Hierdoor zijn mogelijk minder proefmuizen nodig die traditioneel met regelmatige tussenpozen worden geofferd om de tumor te karakteriseren.
Acoerela-celmembraankleurstof
- Sterke NIR-II-fluorescentie (Ex859/Em1017)
- Maakt in vivo beeldvorming mogelijk
- Langdurig signaal (> 14 dagen)
- Geringe cytotoxiciteit
- Zeer goed oplosbaar in water
In-vivobeeldvorming
(Boven) In-vivofluorescentiebeelden van de intracraniële tumor gedurende 14 dagen en de subcutane tumor gedurende 26 dagen (onder) door het verzamelen van emissie van de NIR-II Acoerela-kleurstof. In beide tumoren nam de fluorescentie-intensiteit van de NIR-II Acoerela toe naarmate de tumor in de loop van de tijd groeide, waardoor een niet-invasieve methode mogelijk werd om de tumorgroei te volgen zonder herhaaldelijk muizen te moeten opofferen.
AcoRL Reference Liposomes zijn vooraf gelabelde fluorescerende liposomen, nauwkeurig samengesteld uit een mengsel van biologisch relevante synthetische lipiden en 1 mol% Aco-Dyes ( t.o.v. het totale lipidengehalte). Ze dienen als betrouwbare standaarden voor de optimalisatie van instrumentinstellingen en ondersteunen de fluorescentiegebaseerde analyse.
total lipid content). They serve as reliable standards for optimising instrument settings and supporting fluorescence-based analysis.
AcoRL-liposomen zijn verkrijgbaar in zowel positieve als negatieve controleformaten en hebben een gemiddelde deeltjesgrootte van 50-100 nm. Ze maken nauwkeurige visualisatie en analyse mogelijk van met Aco-Dye gelabelde monsters via flowcytometrie of andere fluorescentiegebaseerde platformen.
VRAAG EEN OFFERTE : ANALIS - NAMUR 081 25 50 50 - GENT 092437710 - WWW.ANALIS.COM/ACOERELA - MAIL@ANALIS.BE
