Les professionnels de la santé prélèvent sur le patient du sang contenant des cellules immunitaires. Un équipement spécialisé isole les cellules immunitaires du reste du sang.
Les cellules T peuvent ensuite être enrichies et lavées pour les séparer des autres cellules.
Vos défis
- Manipulation de virus ou d'agents pathogènes dans des conditions sûres ?
- PBMC avec contamination des GR, débris, faible récupération, mauvaise viabilité, ... Comment améliorer la qualité des PBMC ou des préparations cellulaires ?
- Votre méthode d'analyse de la numération cellulaire et de la viabilité est-elle simple et fiable ?
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Votre processus de cryoconservation a-t-il un impact sur la récupération, la viabilité ou la fonctionnalité des cellules T ?
Nos solutions pour votre flux de travail
- Cabinet de sécurité biologique
- Centrifugeuse Biosafe articles de laboratoire et accessoires
- Centrifugeuse sur coussin dégradé
- Elutriation
- Compteur de cellules automatisé& ; Analyseurs de viabilité
- Trieur de cellules
- Cytomètre en flux pour vérifier la pureté et la viabilité
- Réfrigérateurs, congélateurs et surgélateurs +4°C à -80°C
- N2 liquideConservation cryogénique
- Désinfection
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Stérilisation à la vapeur
Comprendre le rôle vital de l'élutriation centrifuge dans les laboratoires de cytométrie en flux avancés
Bienvenue dans ce guide complet sur le rôle essentiel de l'élutriation centrifuge dans la modernisation et l'optimisation des laboratoires de cytométrie en flux, présenté par le Dr Peter Lopez.
Définitions
Aphérèse
La collecte par aphérèse de la couche de cellules mononucléaires (MNC) s'est avérée être une méthode sûre et efficace pour collecter le grand nombre de lymphocytes T nécessaires à la mise en place de la culture cellulaire CART. L'aphérèse implique l'application d'une force centrifuge à un flux continu ou semi-continu de sang total anticoagulé. Comme les couches cellulaires se séparent en fonction de leur densité, il est possible de les éliminer ou de les remplacer de manière sélective et efficace. La couche de cellules mononucléaires est située entre les couches denses de cellules polymorphonucléaires et de globules rouges et la couche moins dense de plaquettes. Les lymphocytes matures circulants peuvent se trouver dans la couche des MNC ; par conséquent, l'isolement de cette couche fournit les cellules nécessaires pour commencer la fabrication de cellules CAR-T. (*1)
L'isolement
La sélection de constituants cellulaires spécifiques, avec ou sans étape de lavage, permet de purifier les populations cellulaires avant l'ensemencement de la culture de cellules CAR-T. La sélection des cellules s'effectue principalement en fonction de leur densité, de leur taille ou de leurs caractéristiques immunophénotypiques. Les agents de sédimentation, tels que Ficoll-Hypaque, utilisent la densité pour purifier les lymphocytes des produits MNC.(*2)
Sources :
(*1) Fesnak, A., Lin, C., Siegel, D. L., & ; Maus, M. V. (2016). CAR-T Cell Therapies From the Transfusion Medicine Perspective (Thérapies par cellules CAR-T du point de vue de la médecine transfusionnelle). Transfusion medicine reviews, 30(3), 139-145.
https://doi.org/10.1016/j.tmrv.2016.03.001
(*2) Ferrante, A., & ; Thong, Y. H. (1980). Optimal conditions for simultaneous purification of mononuclear and polymorphonuclear leucocytes from human blood by the Hypaque-Ficoll method. Journal of immunological methods, 36(2), 109-117.
https://doi.org/10.1016/0022-1759(80)90036-8