Medische professionals nemen bij de patiënt bloed af dat immuuncellen bevat. Gespecialiseerde apparatuur isoleert de immuuncellen van de rest van het bloed.
T-cellen kunnen vervolgens worden verrijkt en gewassen om ze van andere cellen te scheiden.
Uw uitdagingen
- Virus- of pathogeenmanipulaties in veilige omstandigheden?
- PBMC met RBC-vervuiling, brokstukken, lage recovery, slechte levensvatbaarheid, ... Hoe verhoog je de kwaliteit van PBMC of celpreparaten?
- Is uw analysemethode voor celtelling en levensvatbaarheid eenvoudig en betrouwbaar?
-
Heeft uw cryopreservatieproces invloed op het herstel, de levensvatbaarheid of de functionaliteit van T-cellen?
Onze oplossingen voor uw workflow
- Bioveiligheidskast
- Centrifuge Biosafe labwares en accessoires
- Centrifuge op verlopend kussen
- Elutriatie
- Geautomatiseerdecelteller & Levensvatbaarheidsanalysatoren
- Celsorteerder
- Stroomcytometer om de zuiverheid en levensvatbaarheid te controleren
- Koelkasten, vriezers en diepvriezers +4°C tot -80°C
- VloeibareN2 Cryogene conservering
- Desinfectie
-
Stoomsterilisatie
De essentiële rol van centrifugale elutie in geavanceerde flowcytometrielaboratoria begrijpen
Welkom bij een uitgebreide gids over de centrale rol van centrifugale elutie bij het moderniseren en optimaliseren van flowcytometrielaboratoria, aangeboden door Dr. Peter Lopez.
Definities
Aferese
Aferese inzameling van de mononucleaire cellaag (MNC) is een veilige en efficiënte methode gebleken om het grote aantal T-lymfocyten te verzamelen dat nodig is om een CART-celkweek te starten. Bij aferese wordt een centrifugale kracht uitgeoefend op een continue of halfcontinue stroom anticoaguleerd volbloed. Aangezien de cellagen zich scheiden op basis van dichtheid, kunnen afzonderlijke lagen selectief en efficiënt worden verwijderd of vervangen. De mononucleaire cellaag bevindt zich tussen de dichte polymorfonucleaire cel/rode bloedcellagen en de minder dichte bloedplaatjeslaag. Circulerende rijpe lymfocyten bevinden zich in de MNC-laag; daarom levert isolatie van deze laag de cellen om te beginnen met de productie van CAR-T-cellen. (*1)
Isolatie
Selectie van specifieke celbestanddelen met of zonder een wasstap maakt zuivering van celpopulaties mogelijk voorafgaand aan het zaaien van een CAR-T-celkweek. Celselectie wordt voornamelijk bereikt door celdichtheid, celgrootte of immunofenotypische kenmerken. Sedimentatiemiddelen, zoals Ficoll-Hypaque, gebruiken dichtheid om lymfocyten uit MNC-producten te zuiveren.(*2)
Bronnen:
(*1) Fesnak, A., Lin, C., Siegel, D. L., & Maus, M. V. (2016). CAR-T celtherapieën vanuit het perspectief van de transfusiegeneeskunde. Transfusiegeneeskunde reviews, 30(3), 139-145.
https://doi.org/10.1016/j.tmrv.2016.03.001
(*2) Ferrante, A., & Thong, Y. H. (1980). Optimal conditions for simultaneous purification of mononuclear and polymorphonuclear leucocytes from human blood by the Hypaque-Ficoll method. Journal of immunological methods, 36(2), 109-117.
https://doi.org/10.1016/0022-1759(80)90036-8